為解決養殖過程中濫用抗生素現象,飼料中全面禁止添加促生長類抗生素新規于2019年7月下發,該規定實施后,哺乳羔羊腹瀉率明顯升高,制約了羊產業發展(朱振宇等,2022)。在此背景下,為降低羔羊患病率和死亡率,確保我國羊產業穩定發展,尋找抗生素替代品成為必然趨勢。有學者研究在飼糧中添加枸杞多糖對羔羊血清免疫指標、能量代謝、營養物質表觀消化率的影響(劇浩等,2022)。還有學者研究添加巖藻多糖對羔羊臟器功能(王嘉麟等,2022)、免疫功能(車小蛟等,2022)等指標的影響。近年來,關于在日糧中添加復合益生菌的相關報道不斷增多。如2016年就有學者研究富硒益生菌、亞硒酸鈉對羔羊生長發育以及相關指標的影響(秦順義等,2016)。任建存等(2021)將關中奶山羊作為研究對象,分析酵母培養物對其羔羊生長性能及血液生化指標的影響。鑒于目前日糧添加復合益生菌的研究多以肉仔雞、斷奶仔豬、肉鵝等動物為主,本研究通過試驗分析添加不同比例復合益生菌對哺乳羔羊飼養的影響,旨在為羔羊養殖獲得更多數據參考。
1 材料與方法
1.1 材料來源
復合益生菌以乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌組成,由某農大實驗室分離并進行保存。其中,乳酸桿菌在MRS培養基中,枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌在NB培養基中,均在溫度37℃、180r/min搖床培養24 h。前期按照乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌1∶1∶4的比例進行混合,活菌數量達到108CFU/g。發酵飼料由15%麩皮+25%豆粕+60%玉米組成,含水量45%,在恒溫30℃的密封袋中連續發酵2周。發酵顆粒飼料組成和營養水平詳見表 1.
表1 發酵飼料組成及營養水平(風干基礎)
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項目 |
含量 |
營養水平 |
含量 |
|
麩皮/% |
15.0 |
有機物/% |
89.35 |
|
去皮豆粕/% |
25.0 |
干物質/% |
51.42 |
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玉米/% |
60.0 |
代謝能/(MJ/kg) |
11.95 |
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合計/% |
100 |
粗蛋白/% |
19.60 |
|
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中性洗滌纖維/% |
21.14 |
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酸性洗滌纖維/% |
9.41 |
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鈣/% |
0.78 |
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|
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磷/% |
0.52 |
注:營養水平除代謝能為計算數值外,其余均為實測值。
在試驗過程中,為確保最佳飼用效果,開封后的飼料在室溫下儲存時間≤2周,未開封飼料整體儲存期≤4周。試驗期間,共制作3批次發酵飼料,并對每個批次進行檢驗,確保檢測和試驗結果的準確性。
1.2 試驗動物分組與設計
試驗選擇72只遺傳、生長背景一致的健康哺乳期羊羔,公母各占50%。所有參與本試驗的羔羊均為15日齡。隨機分組。每組公母數量一致,共4個組別,每組18個重復。各組試驗動物均隨母哺乳飼養,同時補飼發酵顆粒日糧。對照組日糧中不含有復合益生菌,試驗1組飼喂含有5%復合益生菌的發酵飼料,試驗2組飼喂含有10%復合益生菌的發酵飼料,試驗3組飼喂含有15%復合益生菌的發酵飼料。預飼期為5d,正試期40 d。
1.3 飼養管理
本試驗開始前徹底對羊舍進行清洗、消毒,試驗期間樣本羔羊隨母哺乳,在母子欄中飼養,其中羔羊欄規格為2.8m×2.0m×0.8m,在母羊欄和羔羊欄中間設置小門。羔羊可隨意進出,母羊則無法進入到羔羊欄中。每天定時飼喂,分別于07:00和17:00.確保各組飼養環境 、管理條件相同,所有試驗動物自由采食和自由飲水。
1.4 指標測定
1.4.1 生長性能
試驗期間,每日記錄給料量、余料量、損耗量,計算采食量。分別于試驗第1天和試驗第40天進行空腹稱重,計算日平均采食量、日平均增重,計算方法如下:
日平均采食量(g/d)=(給料量-余料量)/總試驗天數;
日平均增重(g/d)=(末重-初始重)/總試驗天數。
1.4.2 免疫功能指標
試驗結束后測定4組羔羊血清免疫指標水平,采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)含量,采血前需禁食,在空腹狀態下于次日清晨采集,完成血液樣本采集后嚴格按照ELISA試劑盒進行操作。
1.5 統計學方法
采用Excel表格對數據進行整理,采用SPSS25.0軟件進行單因素方差分析。采用Duncan's進行多重比較,結果用“`X±s”表示,P<0.05表示組間差異顯著,P<0.01 則表示組間差異極顯著。
2 結果
2.1 復合益生菌對羔羊生長性能的影響
由表2可知,各組末重、日平均采食量、日平均增重由高到低的排序均為試驗2組>試驗1組>試驗3組>對照組。其中,在末重、日平均采食量對比上,試驗1組、試驗2組顯著高于對照組、試驗3組(P<0.05),但試驗1組和試驗2組之間無顯著差異(P>0.05),對照組和試驗3組差異不顯著(P>0.05);試驗1組日平均增重顯著高于對照組(P<0.05),試驗2組極顯著高于對照組(P<0.01),試驗3組與對照組之間無顯著差異(P>0.05)。
表2 日糧中添加不同比例復合益生菌發酵飼料對羔羊生長性能的影響
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組別 |
初始重/kg |
末重/kg |
平均日增重/(g/d) |
日平均采食量/(g/d) |
|
對照組 |
6.52±0.28 |
14.30±0.97b |
194.50±17.25Bc |
154.12±11.38b |
|
試驗1組 |
6.48±0.31 |
17.29±0.68a |
270.25±9.28b |
180.21±16.56a |
|
試驗2組 |
6.47±0.36 |
18.34±0.96a |
296.75±15.00Aa |
183.25±17.02a |
|
試驗3組 |
6.50±0.29 |
15.31±0.85b |
220.25±14.00Bc |
161.25±13.27b |
注:同列數據肩標不同小寫字母者表示差異顯著(P<0.05),同列肩標不同大寫字母者表示差異極顯著(P<0.01),下同。
2.2 復合益生菌對羔羊免疫功能指標的影響
由表3可知,試驗1、2組IgG 含量顯著高于對照組(P<0.05)和試驗3組(P<0.05),對照組和試驗3組無顯著差異(P>0.05);試驗2組IgM含量顯著高于試驗1組(P<0.05),極顯著高于對照組和試驗3組(P<0.01),試驗1組顯著高于對照組(P<0.05);各組IgA含量比較均無顯著差異(P>0.05)。
表3 日糧添加不同水平比例益生菌對羔羊血清免疫功能指標水平的影響 μg/ml
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組別 |
IgG |
IgM |
IgA |
|
對照組 |
1308.56±8.31b |
13.66±0.38Bc |
25.41±0.67 |
|
試驗1組 |
1363.19±9.54a |
15.82±0.87b |
26.42±0.67 |
|
試驗2組 |
1374.48±10.52a |
17.45±1.14Aa |
26.75±0.89 |
|
試驗3組 |
1310.14±8.14b |
13.27±0.45Bc |
27.01±0.32 |
3 討論
3.1 不同比例復合益生菌對羔羊生長性能的影響
飼養羔羊過程中,人們發現飼料經過益生菌發酵后可以產生大量有機酸,以乳酸最為典型,使原有飼料呈酸香味。隨著相關研究的不斷深入。普遍認為,適當添加復合益生菌不僅能提高飼料適口性,同時也能顯著增加羔羊進食量,但如果過量添加,羔羊采食量則會呈下降趨勢(郭文亮等.2022)。秦順義等(2014)研究表明,與對照組相比,復合益生菌組羔羊平均末重和日平均增重分別提升了1.94% 、14.08%,證實添加復合益生菌的飼料對羔羊生長性能有明顯促進作用。盧馬寧等(2021)研究表明,在4~5月齡羔羊日糧中添加優化后的復合益生菌、氨基酸,羔羊日平均采食量明顯增加,但應將復合益生菌添加比例控制在40%以下。在本研究中,10%復合益生菌組(試驗2組)與5%復合益生菌組(試驗1組)的末重和日平均采食量無顯著差異,但兩組均顯著高于添加15%復合益生菌組(試驗3組)和對照組,說明添加不同比例復合益生菌會對羔羊采食量及末重產生影響,影響最大的是10%復合益生菌組,這與丁亞偉等(2022)的研究結果一致。本試驗10%復合益生菌組日平均增重顯著高于5%復合益生菌組,極顯著高于15%復合益生菌組和對照組,5%組日平均增重顯著高于15%復合益生菌組和對照組,說明當復合益生菌添加比例達到15%后,羔羊日平均增重不再增加,反而降至不添加復合益生菌水平。綜上所述,日糧添加10%復合益生菌對羔羊生長性能產生的積極影響最大。
3.2 不同比例復合益生菌對羔羊免疫功能指標的影響
血清免疫球蛋白指標包括IgG、IgM、IgA等,上述指標水平可反映動物的全身免疫功能。在免疫球蛋白指標中,IgG 含量最高,是動物機體二次體液免疫的關鍵指標。IgM屬于動物血液中的黏附抗體,能發揮強大的殺菌作用。而IgA則直接參與動物的黏膜免疫反應,是局部抗感染過程的重要參與者。研究證實,巨噬細胞在免疫應答反應中發揮關鍵作用,益生菌超強的黏附力使其對腸道菌群平衡產生調節作用,可顯著增加黏膜底層免疫細胞數量,提高血液抗體水平,從而增加血清IgG含量,即益生菌調節炎癥反應可能是通過影響巨噬細胞極化來實現的(段冰潔等,2021 )。王福剛(2022)研究發現,10%復合益生菌培養物可顯著提高肉羊血清IgG含量。本試驗表明,10%復合益生菌組羔羊血清中IgG含量最高,其次是添加5%復合益生菌,而15%復合益生菌組未明顯增加羔羊血清中IgG含量,與上述報道一致,而出現差異的原因可能是添加過高比例復合益生菌的發酵飼料可對動物機體產生促炎作用,反而降低了羔羊的免疫力。在IgM、IgA含量比較上,權威文獻報道不同比例復合益生菌未對IgM、IgA含量產生明顯影響,其水平與對照組基本持平(晨陽,2022),本研究表明,各組IgA含量無顯著差異,但10%益生菌組可極顯著提升羔羊血清IgM含量,IgM含量出現差異的原因可能與試驗品種、日齡、試驗時間有關。
4 結論
在隨母哺乳羔羊的補飼料顆粒中添加復合益生菌可提高羔羊生長性能,并對提高羔羊免疫力有一定幫助,但需要注意添加比例。在本試驗條件下,添加10%復合益生菌可明顯提高羔羊末重、日平均采食量、日平均增重以及血清IgG、IgM水平。
參考文獻:略。

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[12-22]
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[10-08]
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[09-22]
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[09-15]



