目前,肉雞養殖中使用的抗生素替代品主要有復合有機酸、植物提取物、微生態制劑、抗菌肽等。微生態制劑在改善肉雞腸道健康、提高生長性能方面的效果較理想。微生態制劑可調節動物腸道菌群結構,使有益菌大量在腸道中定植和生長,改善腸道健康。益生菌的代謝產物可刺激動物機體產生肽和緊密連接蛋白,進而起抑菌作用,保證動物腸道微生物區系平衡。肉雞養殖中,腸道炎癥是主要的多發疾病,嚴重影響了肉雞的生長性能及養殖效益。腸道炎癥表現為動物腸道中的有益菌數量減少,有害菌數量增加,導致腸道菌群紊亂。研究發現,日糧中使用乳桿菌可增加肉仔雞腸道中的有益菌數量,如乳酸菌和雙歧桿菌;減少有害菌的數量,如大腸桿菌等致病菌,降低肉仔雞的死亡率。在日糧中添加乳雙歧桿菌可通過改善肉仔雞的腸道健康,提高其生長性能。本研究在AA肉雞日糧中添加不同水平的復合益生菌,探討復合益生菌對肉雞生長性能、免疫力及腸道健康的影響,為復合益生菌在肉仔雞養殖生產中的合理使用提供參考。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
本試驗使用的復合益生菌由干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、乳雙歧桿菌(比例為1:1:2)的凍干菌粉組成,由陜西某生物公司提供,有效活菌數大于3×109CFU/g。
1.2 試驗設計
試驗選取1200只AA肉仔雞,隨機分為4組,每組10個重復,每個重復30只雞。各組AA肉仔雞分別飼喂添加0(對照組)、0.1%(試驗1組)、0.2%(試驗2組)0.4%(試驗3組)復合益生菌的基礎日糧。試驗期6周,分為試驗前期(1~21d)和試驗后期(22~42d)?;A日糧組成及營養水平見表1.
表1基礎日糧組成及營養水平
|
項目 |
1-21d |
22-42d |
營養水平 |
1-21d |
22-42d |
|
原料組成/% |
|
|
代謝能/(MJ/kg) |
12.05 |
12.58 |
|
玉米 |
59.51 |
63.12 |
粗蛋白/% |
20.88 |
19.75 |
|
豆粕 |
30.50 |
28.00 |
鈣/% |
1.02 |
0.88 |
|
魚粉 |
3.00 |
2.00 |
總磷/% |
0.69 |
0.57 |
|
豆油 |
2.50 |
3.00 |
有效磷/% |
0.50 |
0.38 |
|
L-賴氨酸 |
0.83 |
0.77 |
賴氨酸/% |
1.46 |
1.38 |
|
DL-蛋氨酸 |
0.23 |
0.18 |
蛋氨酸+半胱氨酸/% |
0.95 |
0.87 |
|
磷酸氫鈣 |
1.55 |
1.17 |
|
|
|
|
氯化膽堿 |
0.20 |
0.20 |
|
|
|
|
石粉 |
0.88 |
0.76 |
|
|
|
|
食鹽 |
0.30 |
0.30 |
|
|
|
|
預混料 |
0.50 |
0.50 |
|
|
|
|
合計 |
100.00 |
100.00 |
|
|
|
注:1.預混料購自烏魯木齊貿豐飼料有限公司。2.營養水平均為計算值。
1.3 飼養管理
試驗開始前,對試驗場地進行熏蒸消毒處理,通風晾干后開始試驗。試驗前期,第1周為育雛期,嚴格把控雞舍內的溫度和濕度,AA肉仔雞飼養于層疊式育雛籠內;試驗后期將AA肉仔雞轉入到育成舍3層重疊育成籠。試驗期間,AA肉仔雞的免疫程序按照養殖場的日常管理程序進行,自由采食飲水,每日仔細觀察雞群健康狀況,及時淘汰病弱雞。
1.4 測定指標及方法
1.4.1 生長性能
試驗第1、21、42d空腹稱量AA肉仔雞的體重,試驗期間準確記錄每組AA肉仔雞的采食量,計算平均日采食量、平均日增重、料重比。
平均日增重=(末重-初重)/試驗天數 (1)
平均日采食量=總采食量/試驗天數 (2)
料重比=平均日采食量/平均日增重 (3)
1.4.2 免疫功能
分別于試驗的第21、42d,從每個重復中隨機選取10只AA肉仔雞,翅下靜脈采集血液5mL,3500r/min離心6min,取上層的血清于EP管中,用于檢測血清免疫指標。檢測指標包括:免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、腫瘤壞死因子-a(TNF-α)、白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-10(IL-10)。
AA肉仔雞屠宰后,采集脾臟、胸腺和法氏囊稱重,考察免疫器官指數指標。免疫指標檢測的試劑盒購自蘇州卡爾文生物科技有限公司。
免疫器官指數=免疫器官重/活體重 (4)
1.4.3 腸道指標
采集上述屠宰的AA肉仔雞的空腸、十二指腸、回腸約2cm,使用0.9%的生理鹽水將腸道食糜沖洗干凈,使用甲醛固定24h,對空腸、十二指腸、回腸組織進行HE染色,制成石蠟切片。ML-50顯微圖像采集分析系統在光學顯微鏡低倍鏡(40倍)下挑選典型視野拍攝圖片,測量小腸絨毛高度和隱窩深度,計算絨隱比。
1.5 數據統計與分析
試驗數據使用SPSS24軟件進行單因素方差分析,LSD法進行組間多重比較,P<0.05表示差異顯著。
2 結果與分析
2.1 不同水平的復合益生菌對AA肉仔雞生長性能的影響(見表2)
由表2可知,與對照組相比,試驗2組、試驗3組的AA肉仔雞的42日齡體重提高了18.53%、20.26%(P<0.05),1~42日齡肉仔雞的平均日增重提高了18.91%、20.66%(P<0.05),料重比顯著降低了9.14%、9.14%(P<0.05);與試驗1組相比,試驗2組、試驗3組的AA肉仔雞1~42日齡平均日增重比顯著提高了10.20%、11.82%(P<0.05)。
表2不同水平的復合益生菌對AA肉仔雞生長性能的影響
|
項目 |
1日齡體重/g |
42日齡體重/kg |
平均日增重/g·(只·d)-1 |
平均日采食量/g·(只·d)-1 |
料重比 |
|
對照組 |
45.30 |
2.32b |
54.16b |
94.67 |
1.75a |
|
試驗1組 |
45.35 |
2.50ab |
58.44b |
97.67 |
1.67ab |
|
試驗2組 |
45.30 |
2.75a |
64.40a |
102.32 |
1.59b |
|
試驗3組 |
45.30 |
2.79a |
65.35a |
103.78 |
1.59b |
|
SEM |
2.83 |
0.24 |
4.62 |
7.65 |
0.17 |
|
P值 |
0.319 |
0.048 |
0.032 |
0.095 |
0.016 |
2.2 不同水平的復合益生菌對AA肉仔免疫功能的影響(見表3、表4)
由表3可知,與對照組相比,42日齡時,試驗2組、試驗3組AA肉仔雞的脾臟指數顯著提高了24.24%、25.00%(P<0.05),胸腺指數顯著提高了27.87%、30.66%(P<0.05)。
表3不同水平的復合益生菌對AA肉仔免疫器官指數的影響 單位:g/kg
|
項目 |
21日齡 |
42日齡 |
||||
|
脾臟指數 |
法氏囊指數 |
胸腺指數 |
脾臟指數 |
法氏囊指數 |
胸腺指數 |
|
|
對照組 |
0.90 |
1.50 |
3.84 |
1.32b |
0.89 |
2.87b |
|
試驗1組 |
1.02 |
1.79 |
4.16 |
1.49ab |
0.94 |
3.19ab |
|
試驗2組 |
1.05 |
1.80 |
4.34 |
1.64a |
0.96 |
3.67a |
|
試驗3組 |
1.05 |
1.83 |
4.40 |
1.65a |
0.98 |
3.75a |
|
SEM |
0.09 |
0.24 |
0.58 |
0.17 |
0.10 |
0.48 |
|
P值 |
0.173 |
0.087 |
0.104 |
0.044 |
0.138 |
0.039 |
由表4可知,各試驗組AA肉仔雞血清中的IgM和sIgA含量顯著高于對照組(P<0.05);試驗2組和試驗3組AA肉仔雞血清中的IgM和sIgA含量顯著高于試驗1組(P<0.05)。
與對照組相比,試驗組AA肉仔雞血清TNF-α、IL-2含量均顯著降低(P<0.05),IL-10含量顯著提高(P<0.05);試驗2組和試驗3組AA肉仔雞血清中的IL-6含量顯著降低(P<0.05)。
表4 不同水平的復合益生菌對AA肉仔免疫指標的影響
|
項目 |
IgA/(g/L) |
IgM/(g/L) |
IgG/(g/L) |
sIgA/(mg/L) |
TNF-α/(μg/L) |
IL-2/(μg/L) |
IL-6/(μg/L) |
IL-10/(μg/L) |
|
對照組 |
0.50 |
1.47c |
4.07 |
7.73c |
105.45a |
335.60a |
176.04a |
10.56c |
|
試驗1組 |
0.58 |
1.56b |
4.18 |
9.04b |
85.17b |
253.98b |
157.18ab |
11.84b |
|
試驗2組 |
0.65 |
1.68a |
4.25 |
10.63a |
73.06c |
248.39b |
139.17b |
13.45ab |
|
試驗3組 |
0.68 |
1.73a |
4.30 |
11.74 |
69.50c |
245.07b |
128.94b |
14.69a |
|
SEM |
0.08 |
0.25 |
0.59 |
0.84 |
8.32 |
20.65 |
10.74 |
1.52 |
|
P值 |
0.092 |
0.045 |
0.386 |
0.008 |
0.003 |
0.016 |
0.013 |
0.005 |
2.3 不同水平的復合益生菌對AA肉仔雞腸道形態的影響(見表5)
由表5可知,與對照組相比,試驗2組和試驗3組肉雞十二指腸的絨毛高度分別提高了20.29%、21.09%(P<0.05),十二指腸的絨隱比分別提高了21.23%、22.11%(P<0.05)。
表5不同水平的復合益生菌對AA肉仔雞腸道形態的影響
|
空腸 |
十二指腸 |
回腸 |
|||||||
|
絨毛高度/μm |
隱窩深度/μm |
絨隱比 |
絨毛高度/μm |
隱窩深度/μm |
絨隱比 |
絨毛高度/μm |
隱窩深度/μm |
絨隱比 |
|
|
對照組 |
918.45 |
85.27 |
10.77 |
964.97b |
94.38 |
10.22b |
749.06 |
82.64 |
9.06 |
|
試驗1組 |
929.41 |
84.98 |
10.94 |
1063.87ab |
93.80 |
11.34ab |
763.10 |
81.06 |
9.41 |
|
試驗2組 |
953.40 |
84.84 |
11.32 |
1160.73 |
93.65 |
12.39a |
784.26 |
80.86 |
9.70 |
|
試驗3組 |
960.37 |
84.80 |
11.33 |
1168.48a |
93.60 |
12.48a |
790.53 |
80.52 |
9.82 |
|
SEM |
45.62 |
7.04 |
1.39 |
50.74 |
8.64 |
1.30 |
37.04 |
7.43 |
1.28 |
|
P值 |
0.541 |
0.831 |
0.205 |
0.042 |
0.361 |
0.044 |
0.728 |
0.296 |
0.517 |
3 討論
3.1 不同水平的復合益生菌對AA肉仔雞生長性能的影響
本試驗中,與對照組相比,試驗2組和試驗3組的AA肉仔雞42日齡體重顯著提高了18.53%、20.26%;平均日增重顯著提高了18.91%、20.66%;料重比顯著降低了9.14%、9.14%;試驗2組和試驗3組的AA肉仔雞的平均日增重比0.1%復合益生菌組顯著提高了10.20%、11.82%;表明日糧中添加0.2%的復合益生菌可以有效改善AA肉仔雞的生長性能。
田浪等研究發現,黃羽肉雞養殖中使用由枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、酪酸菌組成的復合益生菌,平均日增重最多比對照組提高了4.11%,料重比比對照組降低了4.58%,復合益生菌的最適添加量為0.1%。劉淑嬌等研究發現,由乳酸菌、枯草芽孢桿菌和酵母菌等比例組成的復合益生菌可顯著提高雄性AA肉仔雞的平均日增重和平均日采食量,顯著降低料重比,且復合益生菌的最適添加量為0.6%。本試驗結果與上述結論類似,表明在肉雞日糧中添加適量的復合益生菌可以有效改善肉雞的生長性能。益生菌改善肉雞的生長性能可能是由于有益的益生菌可在動物腸道中有效定植,分泌大量消化酶,幫助動物機體有效吸收日糧中的營養物質,進而提高動物的生長性能。
3.2 同水平的益對AA肉仔免疫功能的影響
家禽主要的免疫器官主要有胸腺、脾臟、法氏囊,對機體的中樞、外周及體液免疫起至關重要作用,其發育狀況能夠反映機體的免疫水平。本研究中,42日齡時,試驗2組和試驗3組的AA肉仔雞的脾臟指數比對照組顯著提高了24.24%、25.00%;胸腺指數比對照組顯著提高了27.87%、30.66%,表明AA肉仔雞飼喂0.2%水平復合益生菌可以有效促進其免疫器官的生長發育。謝童等研究表明,在黃羽肉雞日糧中使用0.1%復合乳酸菌制劑可顯著提高肉雞脾臟指數,添加0.2%可顯著提高法氏囊指數。郭欣怡等研究表明,飼喂1mL/kg的乳酸菌可顯著提高AA肉仔雞胸腺指數、脾臟指數和法氏囊指數。因此,在肉雞養殖中使用適量的益生菌制劑可促進免疫器官的生長發育。
動物機體內的免疫球蛋白及細胞因子對機體的體液免疫和細胞免疫功能至關重要。免疫球蛋白可清除病原微生物及抗原,溶解細菌,中和病毒,在免疫調節和預防疾病方面發揮重要功能。細胞因子包括促炎因子和抗炎因子,當動物機體受病原微生物侵害時,Thl細胞產生促炎因子,而Th2細胞可分泌白細胞介素,其中IL-10是一種非常重要的抗炎因子。本研究中,各試驗組AA肉仔雞血清中的IgM和sIgA含量顯著高于對照組;試驗2組和試驗3組AA肉仔雞血清中的IgM和sIgA含量顯著高于試驗1組;與對照組相比,各試驗組肉仔雞血清中的TNF-α、IL-2含量顯著降低,IL-10含量顯著提高;試驗2組和試驗3組AA肉仔雞血清中的IL-6含量顯著升高。本研究結果表明,AA肉仔雞飼喂適量的復合益生菌可增強機體的體液免疫和細胞免疫功能。宋丹等在AA肉公雞日糧中添加1g/kg包被植物乳桿菌+1g/kg屎腸球菌可提高IgA、IgM、IgG含量,提高抗炎因子IL-10的含量,降低促炎因子TNF-α、IL-2、IL-6的含量。于明等研究發現,添加1.0%復合益生菌能夠明顯提高肉雞血清IgA和IgG含量。Wu等研究發現,使用植物乳桿菌可增加肉雞回腸黏膜IL-10的表達量。益生菌可有效調節動物機體的免疫系統,通過平衡機體內的抗炎因子和促炎因子水平激活機體的免疫系統,防止病原微生物的侵害,穩定動物腸道的內環境。
3.3 不同水平的復合益生菌對AA肉仔雞腸道形態的影響
腸道的健康發育對機體吸收飼料中的營養物質至關重要,主要的檢測指標包括小腸絨毛的高度、隱窩深度及二者的比值。本研究中,與對照組相比,試驗2組和試驗3組肉雞十二指腸的絨毛高度顯著提高了20.29%、21.09%,絨隱比分別提高了21.23%、22.11%。結果表明,在AA肉仔雞日糧中使用0.2%的復合益生菌可促進腸道發育,改善腸道健康。
田浪等研究發現,在日糧中使用300g/t的復合益生菌可顯著提高黃羽肉雞十二指腸的絨毛高度及絨隱比。謝文惠等研究表明,使用由枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、嗜酸乳桿菌、乳雙歧桿菌組成的復合益生菌,可改善AA肉仔雞小腸絨毛高度、隱窩深度及絨隱比,但影響不顯著。張彩鳳等在肉仔雞日糧中添加1000mg/kg的復合益生菌(乳酸菌+酵母菌)顯著提高了空腸絨毛高度和絨隱比。益生菌能夠改善腸道健康的原因是益生菌進入動物腸道中可有效在腸道定植,抑制有害菌繁殖,阻止有害菌對腸道黏膜的損害作用,保證腸道形態及功能的完整性。
4 結論
本試驗結果表明,在日糧中添加一定水平的復合益生菌可以改善AA肉仔雞的生長性能、免疫功能及腸道健康,綜合生產成本考慮,復合益生菌在AA肉雞生產中的適宜添加量為0.2%。
參考文獻:略

-
[02-02]
-
[01-26]
-
[01-19]
-
[01-12]
-
[01-05]
-
[12-22]
-
[10-13]
-
[10-08]
-
[09-22]
-
[09-15]



