裸藻源β-1,3-葡聚糖是被廣泛認可的高效免疫調節劑，它可以提升動物機體免疫力，在人和動物中都有很好的推廣和應用，研究成果也在不斷推陳出新。2022年底在國際知名獸醫雜志Open Veterinary Journal發表了一篇其在豬上的研究成果，題目和作者見圖1。題目簡單地說明了β-葡聚糖對非洲豬瘟病毒的影響，從文中材料與方法可知其葡聚糖為線性裸藻源β-1,3-葡聚糖。本篇譯文將挑選幾項重點研究結果，以饗讀者。

圖1 β-葡聚糖的免疫效果研究發表文章題目截圖

　　01目的

　　在這項研究中，作者以豬肺泡巨噬細胞（PAM）模型研究裸藻源β-1,3-葡聚糖對PAM活力的作用效果。

　　02材料與方法

　　為評估裸藻源β-1,3-葡聚糖對豬肺泡巨噬細胞的潛在影響， 本研究采用MTT比色法評估裸藻源β-1,3-葡聚糖對免疫細胞增殖的影響。

　　收集豬肺泡巨噬細胞，通過血細胞計數器計數，使用培養基對原代肺泡巨噬細胞進行稀釋，使細胞濃度為106個/ml。

　　將該細胞懸液用100μl移液器均勻分配到96孔微量滴定板中，并在5%CO2中孵育24小時，培養溫度為37°C。

　　用0μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖(對照組)、30μg/ml 裸藻源β-1,3-葡聚糖和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預處理肺泡巨噬細胞2小時, 然后使用103HAD50/ml的越南非洲豬瘟病毒（ASFV）HN02毒株攻毒。

　　在5%CO2、37°C條件下孵育24、48、72、96和120小時，使用MTT試劑盒測定細胞增殖結果，通過實時熒光定量PCR進一步檢測裸藻源β-1,3-葡聚糖對越南分離的田間ASFV毒株的潛在影響。

　　使用夾心酶聯免疫吸附測定法檢測裸藻源β-1,3-葡聚糖誘導的干擾素（IFN）-α和白細胞介素（IL）-6的濃度。

　　03結果與討論

　　3.1裸藻源β-1,3-葡聚糖能促進豬肺泡巨噬細胞的活力

　　用30和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預處理豬肺泡巨噬細胞2小時，對照組未加入裸藻源β-1,3-葡聚糖處理，然后使用103HAD50/ml的越南非洲豬瘟病毒（ASFV）HN02毒株攻毒，在5%CO2 在37°C條件下孵育24、48、72、96和120小時，用MTT試劑盒測定細胞增殖，結果如圖2所示。

圖2 MTT比色法測定β-1,3-葡聚糖對PAM細胞活力的影響

圖表來源：Open Veterinary Journal,2022

　　結果表明，與對照組相比，30或50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖處理組能夠以劑量依賴性方式提高細胞存活率，并且這些效果一直持續到120小時。

　　3.2裸藻源β-1,3-葡聚糖對豬肺泡巨噬細胞有免疫增強作用

　　使用30μg/ml和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預處理 PAM 2小時后，暴露于103HAD50/ml ASFV 持續 12、24小時。

　　收集上清液，然后對ASFV的DNA p72基因進行實時PCR擴增，檢測裸藻源β-1,3-葡聚糖處理的PAM中病毒DNA的拷貝數，結果如圖3所示。

　　與對照組相比，使用裸藻源β-1,3-葡聚糖處理的PAM感染12小時后的病毒滴度顯著降低。

圖3 裸藻源β-1,3-葡聚糖對PAM抗病毒活性的影響

圖表來源：Open Veterinary Journal,2022

　　3.3高劑量的裸藻源β-1,3-葡聚糖顯著增強了病毒感染后PAM中IFN-α和IL-6的產生

　　用30μg/ml和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預處理PAM 2小時并設立對照組，然后暴露于103HAD50/ml ASFV病毒條件下，持續12小時（A、C）和24小時（B、D）產生的細胞因子IFN-α和IL-6如圖4。

圖4 裸藻源β-1,3-葡聚糖處理PAM后感染ASFV產生細胞因子的濃度對比

備注:

A:12小時IFNα濃度（pg/mL）

B:24小時IFNα濃度（pg/mL）

C:12小時IL-6濃度（pg/mL）

D:24小時IL-6濃度（pg/mL）

圖表來源：Open Veterinary Journal,2022

　　與對照組相比，裸藻源β-1,3-葡聚糖（30μg/ml和50 μg/ml）兩個處理組在12h時IFN-α和IL-6的產生均顯著增加，并持續到24h。

　　高劑量的裸藻源β-1,3-葡聚糖顯著增強了感染后PAM中IFN-α和IL-6的產生。

　　04結論

　　本研究結果揭示了裸藻源β-1,3-葡聚糖對ASFV的影響，其作用機制可能與細胞免疫反應有關，且對裸藻源β-1,3-葡聚糖存在劑量依賴作用。

　　此外，研究還表明，裸藻源β-1,3-葡聚糖可以顯著提升宿主免疫力。