（一） 保持無菌室無菌狀態，每日做空氣落菌實驗（采用平板計數法），發現有雜菌污染及時進行空氣熏蒸。

（二）使用無菌室前，先檢查室內無菌玻璃器皿是否足夠，再用紫外燈滅菌無菌室30分鐘。

（三）進入無菌室先洗手，然后更換無菌工作衣、帽、鞋，打開超凈工作臺，用75％酒精棉球擦拭消毒手后進行無菌操作。

（四）嚴格進行無菌操作，操作時不得講話。

（五）操作完畢后使用專用抹布浸消毒液將工作臺擦拭干凈，地面用專用拖把拖干凈，并以紫外燈照射30分鐘。

（六）使用酒精燈時，注意酒精不應超過容量的2/3，燈內酒精不足1/4時，應滅火后添加酒精。燃著的燈焰應用燈帽蓋滅，不可用嘴吹滅，以防引起燈內酒精起燃。酒精燈應用火柴點燃，不應用另一正燃的酒精燈來點，以防失火。

（七）無菌室內用具應專用，不得帶出無菌室。

（八）做完實驗后，檢查無菌玻璃器皿數量，若數量較少需補充，應及時通知有關人員。

（九）離室前工作人員應檢查所用儀器是否斷電，水是否關好，酒精燈是否熄滅并將試劑、用具、無菌工作衣、鞋帽放回原處，并將有關特別事項，詳細告知接班人員。